绝对分子量测量的原理:
1.静态光散射法(SLS)
静态光散射法是基于分子对光的散射特性来测定其分子量。该方法通过测量溶液中分子散射光的强度,利用光散射公式计算出溶液中分子的分子量。其原理是,当光通过溶液时,分子会散射光线,散射强度与分子量有一定的关系。
SLS法的优点在于其不依赖于标准样品,可以用于分子量较大且复杂的物质,如聚合物、蛋白质等。通过对不同浓度溶液的光散射数据进行分析,可以得到分子的绝对分子量。
2.动态光散射法(DLS)
动态光散射法是一种基于光散射原理的技术,主要用于测定溶液中分子的平均粒径以及动态行为。DLS技术通过测量分子在溶液中的布朗运动,分析粒子的扩散系数,并根据斯托克斯-爱因斯坦方程计算分子量。对于大分子(如聚合物、蛋白质等),DLS能够快速提供准确的分子量信息。
DLS技术的优势在于它能够快速获取分子的粒径和分子量分布,对于低浓度和小体积的样品特别有效。但它的缺点是对于高度聚集的分子,测量结果可能受到干扰。
3.质谱法(MS)
质谱法是通过测量分子的质量与电荷比(m/z)来推算分子量的技术。在质谱中,分子在高电压下被离子化,形成带电的离子,离子被加速并通过质谱仪进行分离。分离后的离子根据其质量电荷比被检测并记录,从而得到分子量。
质谱法在分子量测定中具有很高的灵敏度和准确度,尤其适用于复杂分子(如蛋白质、药物分子等)的精确定量。其优点是可以提供详细的分子结构信息,并且能够测量分子碎片,有助于分子结构的分析。
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